血清的基本概念:
血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。因血清中包含細胞生長所需的多種成分,現(xiàn)已成為生命科學研究、生物制品生產(chǎn)等各種與細胞培養(yǎng)相關的領域中的必bei實驗/生產(chǎn)原料。
血清為細胞提供的成分包括:
1. 基本營養(yǎng)物質;
2. 激素;
3. 生長因子;
4. 結合蛋白、血清蛋白等;
5. 促接觸和伸展因子;
6. 蛋白酶抑制劑;
7. 微量元素和離子。
常用血清分類:
以上三種血清中胎牛血清的品zhi最高,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少,因此價格也最高。
血清使用注意事項:
1. 血清的使用與選擇
血清的使用濃度一般在5%~20%,最chang用是10%。有些細胞需要胎牛血清才能生長,而有些細胞有小牛血清就能生長。因此,要根據(jù)具體用途與需要選擇合適的血清。
2. 血清的儲存與解凍
(1)儲存:建議將血清儲存在-15℃~-20℃。注意:建議不要將血清儲存在-80℃中?。ㄒ驗閮Υ嬖?80℃,解凍時巨大的溫差會使血清產(chǎn)生更多的沉淀。)
(2)解凍:不建議于4℃過夜解凍,也不建議直接將冷凍的血清放在37℃水浴或者溫箱中解凍,因為若血清沒有混勻,底部的蛋白會變性形成沉淀。
血清解凍的方法(三步法):
注意:在水浴過程中,血清要完quan浸入水中,同時在融化過程中要慢慢搖動瓶身混勻血清,但在搖動中盡量不要產(chǎn)生泡沫。血清在解凍后,可以根據(jù)實驗需求分裝成單次用量,密封好后立即放回-20℃冰箱繼續(xù)儲存以供進一步使用,這樣可以有效避免反復凍融的問題。
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